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氨基酸等电点

2023-01-10 17:15:39 暂无评论 百科资料

在某一pH的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程据飞推经低广凯图科度相等,成为兼性离子,呈电中性,此时的溶液pH称该氨基酸的等电点。

  • 中文名称 氨基酸等电点
  • 外文名称 Isoelectric point of amino acids
  • ph 称该氨基酸的等电点。
  • 定义 氨基酸净电荷为零时的pH值
  • 计算公式 pI=1/2(pKa1+PKa2)

基酸等电点

  isoeletric point ,pI 定义:

  2、氨基酸净电荷为零时的pH值。

  3、氨基酸是两性电解质,在碱性溶液中表现出带负电荷,在兵越握含松游岁既酸性溶液中表现出带正电荷,在某一定pH溶液中,氨基酸所带的正电荷和负电荷相等时的pH,称为该氨基酸的等电点。

pI的计算公成顺优轮居述南式:

  1、对于侧链R基不解来自离的中性氨基酸来说,pI=1/2(pKa1+PKa2)。

  2、对于有多个解离基团的氨基酸来说,只要写出它的解离公式,然后取等电兼性离子两边的pKa的平均值则得出其pI值。

  注:pI值与该离子浓度基本无关,只取决于等电中性离子A两侧的pK值。

氨基酸的浓度测定

  1、氨基酸的甲醛滴定(formal titration)

原理

  氨基酸虽然是一种两性电解质,即是酸性又是碱性,但它却不能直接用酸碱滴定来进行测量。这是因为氨基酸的酸碱二推微滴定的等电点pH过高(12-13)或是过低(1-2)没有适合的指示剂可备选用。而向氨基酸中加入过量的甲醛,用氢氧化钠滴定时,由于甲醛可与氨基酸上的-NH3结合,形成-NH-CH2OH、-N(CH2-OH)2等羟甲基衍生物,而降低了氨基酸来自的碱性,相对增强了-N360百科H3的解离,使滴湖眼结跟鲁法首预节章定终点移到了pH9附近,在酚酞指示剂的变色区域内,能够米吧味接认境息用酚酞作为指示剂进行滴定。

  以上出自《生物化学》(高等教育出版社 2006.5,王镜岩等主编)

流程

  甲醛滴定法测定氨基酸含量

  目的

  初步掌握甲醛滴定法测定氨基酸含怕很轮路情省肉面独啊量的原理和操作要点

  原理

  水溶液中的氨基酸为兼性离子,因而不世证笔角就能直接用碱滴定氨基酸的羧基。甲醛可与氨基酸上的-NH3结合,形成-NH-CH2OH、-N(CH2-OH)2 等羟甲基衍生物,使NH3上的H游离出来,这样就可以用碱滴定NH3放出H,测出氨基氮,从而计算氨基酸的含量。

  若样品中只含有单一的已知氨基酸,则可由此法滴定的结果算广虽背仅并它找现单见列出氨基酸的含量。若样品收画所矛波中含有多种氨基酸(如蛋白质水解液),测不能由此法算出氨基酸的含量。

  脯氨酸与甲醛作用后,生成的化合物不稳定,导致滴定后结果偏低;酪氨酸含酚基结构,导致滴定结果偏高。

  部沉展反茶响材料、试剂与器具

  (一)试剂

  1、0.5%酚酞酒精溶职山资

  称0.5g酚酞溶于100ml60%酒精中。

  2、0.05%活迅溴麝香草酚蓝溶液

且教除些子开己印社沿  取0.05溴麝行草酚蓝溶于100ml 20%乙醇溶液中。

  3、1%甘氨酸溶液

  取1g甘氨酸溶于100ml蒸馏水。

  4、标准0.100m员初门殖快口轮ol/L 氢氧化钠溶液

  5、中性甲本醛溶液

  取甲醛溶液50ml,加0.5%酚酞指示剂约3ml,滴加0.1mol/LnaOH溶液,使溶液呈微粉红色,临用前中和。

异答引养送  (二)实验器具

  1、锥形瓶 2、碱式滴定

  3、 移液管洗耳球 4、天平

  5、容量瓶 6、试剂瓶

  7、量筒 8、玻棒与烧杯

操作步骤

  1、取3只100ml锥形瓶,按下表加入试剂

  锥形瓶编号

  试剂

  样品1

  样品2

  空白

  1%甘看便了草达民色错沉氨酸溶液或样品(ml)

  2.0

  2.0

  -

  蒸馏水(ml)

  5.0

  5.0

  7.0

  中性甲醛溶液(ml)

  5.0

  5.0

  5.0

  0.05%溴麝香草酚蓝溶液(滴)

  2

  2

  2

  0.5%酚酞乙醇溶液(滴)

  4

  4

  4

  2、混匀后用标准0.100mol/L氢氧化钠溶液滴定至紫色(p到季死云山失范H8.7~9.0)

  3、结果计算

  每毫升氨基酸溶液中含氨基氮的毫克数为

  式中:V1为滴定样品消耗氢氧化钠的体积(ml);

  V2为滴空白消耗氢氧化钠氧花将考理局第白我的体积(ml);

  1.4008 为1ml 0.1mol/L氢氧化溶液相当的氮量(mg)

注意事项

  利用甲醛滴淀法可以用来测定蛋白质的水解程度。随着蛋白质水解度的增加,滴定值也增加,当蛋白质水解完成后,滴定值不再增加。

氨基酸等电点表

  甘氨酸5.97

  丙氨酸6.00

  缬氨酸5.96

  亮氨酸5.98

  异亮氨酸6.02

  苯丙氨酸5.48

  丝氨酸5.68

  苏氨酸6.16

  酪氨酸5.66

  半胱氨酸5.05

  蛋氨酸5.74

  脯氨酸6.30

  色氨酸5.89

  赖氨酸9.74

  精氨酸10.76

  组氨酸7.59

  天冬氨酸2.77

  谷氨酸3.22

  天冬酰胺5.41

  谷氨酰胺5.65

  出自《有机化学》(高等教育出版社 2004.11,曾昭琼主编)

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