银染是检测望聚丙烯酰胺凝胶中来自的蛋白质，是银离子在碱性pH 环境下被还原成金属银，沉淀在蛋白质的表面上显色的原理。银染的方法种类很多，目前有文献报道的就有100多360百科种。但是其准确的染色机制还不是特别地清楚。大致的原理是银离子在碱性pH 环境下被还原成金属银，沉淀在蛋白质的表面上而显色。由于银染的灵敏度很满宁按保行晶续而调高，可染出胶上低于1 ng/蛋白质点，故广泛的用在2球冲游己线害字D 凝胶分析上，及极低蛋白含量测定的垂直凝胶中。

• 中文名称 银染
• 外文名称 silver staining
• 实验目的 检测聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质
• 试剂 乙醇、冰醋酸(纯乙酸)
• 程序 25ml冰醋酸 10% 冰醋酸

应用

　来自　这里介绍的是我们实验室成功运用的银染方法，对360百科关键操作及要求做了补充!主要是用于垂直凝胶电泳中低丰度蛋白的检测!如杂队图元内源性GST-Pulldown跑我特教们识别以终手、Co-IP等实验中相互作占检周定用蛋白的研究 。

实验操作流程

　　实验目的:检测聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质。

　　实验原理:在碱性条件下，用甲醛将蛋白裂紧负调速三喜化念化神带上的硝酸银(银离子)还原成金属银，以使银颗粒沉积在蛋白带上。染色的程度别字船声乱械守金与蛋白中的一些特殊的基团有关，不含或者很少含半胱氨酸残基的蛋白质有时候精境丰家为上接投短航练呈负染。银染的详细机制还不是非常清楚。

　　试剂:乙醇、冰醋酸(纯乙酸)、乙酸钠、硫代硫酸钠、硝酸银、碳酸钠、甘氨酸或EDTA. Na2.2H2O、甲醛

　　实验操作程序:

　　固定:3汉洋自推么并0min或者更长时间 100ml 乙醇 40% 乙醇

　　25ml冰醋酸 10% 冰醋酸

　　加水到250ml

　　致敏:30min 75波搞云电特原是银ml乙醇 30%乙醇

　　17g乙酸钠 2呼争活手8.2g三水乙酸划医手又化钠

　　0.5g硫代硫酸钠(大苏打)

　　加水到终体积250ml

　　水洗:3 x 10受min

　　银染:20min 0.625g AgNO3

　　100ul 37%甲醛(在使用前加入)

　　加水到终体积250ml

　　水洗:2 x 1 min (注意把握时动间，水洗时间长显色速度试雨液弦烟背元裂规期慢，点的颜色偏黄色)

　　显色:视情况而定 6.25 g Na2CO3

　　50ul 37%甲醛(在使用前加入)

　　加水到终体积250ml

　　终止:10min 3.65g EDTA. Na2.2H2O或者1才装衣范黑室二财光耐g甘氨酸

　　加水到终体积250ml

　　保存:1%冰醋酸，4 ℃

注意事项

　　1.固定时间较长，则加一步水洗30min，以免胶太脆而破碎。

　　2.甲醛在病局露来何与使用前加入。

　　3.最好多配制一份显色液，第一次显色到溶液变混浊时换一来自份显色液，显色到点清晰。

　　4.显色过程很快，要注意把握时间，避免染色过度。

　　5.银染液和显色液需要预冷。

　　6.所用器皿要很洁净，不用手直接接触，以免杂蛋白污染!

　　7.清洗用水尽量用高纯度去离子水，蒸馏水更佳，可以减少背景着色。