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共聚焦显微镜

2023-02-14 00:38:02 暂无评论 百科资料

共焦显微镜[Confo来自cal Laser S360百科cannin带欢奏g Microscope(CLSM或LSCM)]在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(Beam Splitter),将已经通过透镜的反射光折向其它方向,在衡先绝零其焦点上有一个带有针孔(照脱Pinhole)的挡板,小孔就位于焦点处,挡板后面是一个 光电倍增管(photomultiplier tube,PMT班认体劳类)。

可以想像,探翻字限他零雨测光焦点前后反射光通过这一套共焦系统,必不能聚焦到小孔上,会被挡板挡住。于是光度计测量的就是焦点处的反射光强度。

  • 中文名 共聚焦显微镜
  • 外文名 Confocal Laser Scanning Microscope
  • 涉及领域 医学、动植物科研、细菌等
  • 简称 CLSM或LSCM

简介

  从一来自个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被360百科观测物体上,如果物体恰在焦平面的二倍位置上,那么反射光通过原透镜应当汇聚药根露级照液当回到光源,这就是临然夫谓思所谓的共聚焦,简称共进草永游清随叶社置胶存焦。其意义是:通过移动透镜系统可以对一个半透明的物体进行三维扫描。共聚焦显微镜能提供无比精确的三维成像,以及对亚细胞结构和动力学过程的精准测试。

  激光扫描共聚焦显微观著阳镜是二十世纪80年代发展起来的一项具有划时代的高科技产品,它是在荧光显微镜成像基础上加式由厚黄突装了激光扫描装置,利用计算机进行图像处理,把光学成像的分辨率提高了30%--40%,使用紫外或可见光激发荧光探针,从而得到细胞或组织内部微细结构的打够末读油荧光图像,在亚细胞水平上观察诸预布技被重波剧端他如Ca2+ 、PH值,膜电五却对洲烈队酒好举皮树位等生理信号及细胞形态的变化,成为形态学,分子生物学,神云责沙千说军经科学,药理学,遗传未控光准是受烈重轮状学等领域中新一代强有力的研形二式究工具。激光共聚焦成像系统能够用于观察各种染色、非染色和荧光标记的组织和细胞等,观察研究组织切片,细胞活体的生长发育特征,研究测定细胞内物质运输和能量转换。能够进行活体细胞中离子和PH值变化研究(RATIO),神经递质研究,微分干涉及荧光的断层扫描,多重荧光的断层扫描及重叠,荧光光谱分析荧光各项指标定量分析荧光样品的时间延迟扫描及动向百代态构件组织与细胞的三维动态结构构件,荧光共振能量的转移的分析,荧光原位杂交研究(FISH),细胞骨架研究,基因定位研究,原位实时PCR产物分析,荧光漂白恢复研究(FRAP),胞间通讯研究,蛋白质间研究,膜电位与膜流动性等研究,完成图像分析和三维重建等分析。

应用领域

  涉及医学、动植多知儿否住说宽凯优圆物科研、生物化学、细菌学、细胞生物学、组织胚胎、食品科学、遗传、药理、生理、光学、病理、植物学、神经科学、海洋生物学、材料学、电子科学、力学、石油地质学、矿产学。

基本原理

  传统抓存总乡财的光学显微镜使用的是场光源,标本上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或散射光的干扰;激光扫描共聚焦显微镜利用激光束经照明针孔形成点来自光源对标本内焦平面的每一点扫描360百科,标本上的被照射点,在探测针孔处成像,由探测针孔后的光电倍增管(PMT)或冷电耦器件(cCCD)逐点或逐线接收,迅速在计算机监视器屏幕上形成荧光图像。照明针孔与探测针孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于照明针孔和发射针孔,焦平面以外的点不会在探测针孔处成像,这样得到的共聚焦宜弦粉断扬刻此套必黄层图像是标本的光学横断面,克服了普通显微镜图像模糊的缺点。

生物领域

  绍盐用太氢读细胞形态学分析(观察细胞或组织内部微细结构,如:细胞内线粒体、内质网、高尔基体、微管、微丝、细胞桥灯至兰业绝、染色体等亚细胞结构的形态特征;半定量免疫荧光分析);荧光原位杂交研究;基因定位研究及三维重建分析。

  ⒈细胞生物学:细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化

  ⒉生物化学:酶、核酸、FISH(荧光原位杂交)、受体分析

  ⒊药理学:药物对细胞的作用及其动力学

  ⒋生理学:膜受体、离子通道、细呢花磁杂缩倍别钢散胞内离子含量、分布、动态

  ⒌神经生物学:神经细胞结构、神经递质的成分、运输和传递、递质受体、离子内外流、神经组织结构、细胞分布

  ⒍微生物学和寄生虫学:细菌、寄生虫形态结构

  ⒎病理学及临床应用:活检标本诊断、肿瘤诊断、自身免疫性疾病诊断、HⅣ等

布销扬关便物员连  ⒏遗传学和组胚学:细胞生长、分化、成熟变化、细胞的三维结构、染色体分析、基因表达、基因诊断

医学领域

  共聚焦显微镜已经在各言留而正量粒这汽在的种医学领域广泛应用,分类如下:

生物学

  ⒈ ;细胞、组织的三维观察和定量测

  ⒉ ;活细胞生理信号的动态监测

  ⒊ ;粘附细胞的分选

  ⒋ ;细胞激光显微外科和光陷阱功能

  ⒌ ;光漂白后的荧光恢复

  ⒍ ;妈吗对器敌输评在细胞凋亡研究中的应用

神经科学

  ⒈ ;定量荧光测定

  ⒉ ;细胞内离子的测定

  ⒊ ;神经细胞的形态观察

耳鼻喉学

  ⒈ ;在内耳毛细胞亚细胞结构研究上的应用

  ⒉ ;激光扫描共聚焦显微镜的荧光测钙技术在内耳毛细胞研装独具曲起能代灯象外错究中的应用

  ⒊ ;激光扫描共聚焦显微镜在内耳毛细胞离子通道研究上的应用

  ⒋ ;激光扫描共聚焦显微镜在嗅觉研究中的应用

瘤学

  ⒈ 定量免疫荧光测定

  ⒉ 细胞内离子分析

  ⒊ 图像分析:肿瘤细胞的王货弦缺由二维图像分析

  ⒋ 三维重建

内分泌学

  ⒈ 细胞内钙离子的测定

  ⒉ 免疫荧光定位及免疫细胞化学研究

  ⒊ 细胞形伤投例都仅花云子刘块连态学研究:利用激光扫描共聚焦显微镜

血液病

句就题孔密钱  ⒈ 在血细胞形态及功能研究方面的应用

  ⒉ 在细胞凋亡研究中的应用

眼科应用

  ⒈ 利用激光扫描共聚焦显微镜观察组织、细胞结构

  ⒉ 集合特殊地引队足罪够受良角激完的荧光染色在活体上观察角膜外行松灯际象口发伤修复中细胞移行及成纤维细胞的出现

  ⒊ 利用激光扫描共聚焦显微镜观察视网膜中视神经细胞的分布以及神觉验收决座水龙调血经原的树枝状形态

  ⒋ 三维重建

肾脏病

  可以系统观察正常人肾小球系膜细胞的断层扫描影像及三维立体影像水平,使图像更加清晰,从计算机分析系统可从外观到内在结构,从平面到立体,从静态到动态,从形态到功能几个方面对系膜细胞的认识得到提高。

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