Cre/loxP重组酶系统，指的是条件性基因味技药送陆身打靶、诱导性基编还行富因打靶、时空特异性基因打靶策略的技术核心，在新型基因打靶中获得广泛应用，是由Sternberg和Hamilton提出。
- 中文名称 Cre/loxP重组酶系统
- 提出者 Sternberg和Hamilton
- 提出时间 1981
- 应用学科 生物学
- 适用领域范围 基因打靶
重组酶与序列
Cre重组酶:于1来自981年从P1噬菌体中发现，属于λ Int酶超基因家族。Cre重组酶基因编码区序列全长1029bp(EMBL数据库登录号X03453)，编码由 343 个氨基酸组成的38kD精改冲降a单体蛋白。它不仅具有催化活性，而且与限制酶相似，能识别特异的 DNA 序列，即 loxP 位点，使 loxP位点间的基因序列被删除或重组。Cre重组酶有70%的重组效率，不借助任何辅助因子，可作用于多种结判乡序轴训构的 DNA 底物，如线形、环状360百科甚至超螺旋 DNA。它 是一种位政灯步深真在义点特异性重组酶，能介导两个LoxP位点(序列)之间的特异性重组，使Lo苏器你免xP位点间的基因序列被删剂顾可物斗甚除或重组。
LoxP(l械仅煤ocus of X (cross)-overinP1)序列:来源于P1噬菌体，是由两个13bp反向重复序列和中间间隔的8bp序列共同组成，8b教沙探需括p的间隔序列同时也确定了LoxP的方向。Cre在催化DNA链交换过程中与DNA共价结合，13bp的反向重复序列是Cre酶的结合域。其序列如下:
5' - ATAACTTCGTATA - GCATACAT - TATACGAAGTTAT - 3'
3' - TATTGAAGCATAT - CGTATGTA - ATAT器六应GCTTCAATA - 5'
系统的特性
Cre重组酶介导两个LoxP位点间的重组是一个动态、可逆的过程，可以分成三种情况:
1、如果两个LoxP位点位于一条DN测杂书所弦化北关A链上，且方向相同，Cre重组酶能有效切除两个LoxP位点间的序列;
2、如果两个LoxP位点位于一条DNA链上，但方向相反，Cre重组酶能导致两个LoxP位点间的序列倒位;
3、如果两个LoxP位点分别位于两条不同的DNA链或染色体上，Cre酶能介导两条DNA链的交换或染色体易位。
另外，Cre不仅可以识别曲或坏贵神渐LoxP的2个13bp调队刘九河指司生的反向重复序列和8bp的间隔区域，而且当一个13bp的反向重复序列或者8bp的胶育沿威掌测联渐掌广终间隔区发生改变时仍能识福别并发生重组。利用这一特点，人们在构建载体时可以根据需要改造LoxP位点序列，以用于特定的基因突变或修复，增加了该系统的应用范围。
应用策略
基于Cre/loxP的基因打靶要分两步来进行。首先要在胚胎干细胞的基因组中引入loxP序列，这一步可以通过打靶载体的设计和对同源重组子的筛选来实现。下一步通过Cre介导的重组来实现靶基因的遗传修饰或改变。Cre/loxP系统既可以在细来自胞水平上用Cre重组360百科酶表达质粒转染中靶细胞，通过识别loxP位点将抗性标记基因切穿却项置古再核离湖创何除，又可以在个体水平上将重组杂合子小鼠与Cre转基因小鼠杂交，筛选子代小鼠就可得到删除外源标记基因的条件性敲除小鼠。或者将探假周Cre基因置于可诱导的启动子控制下，通过诱导表达Cre重组酶而将lox条P位点之间的基因切除(诱导性基因敲除)，实现特定基因在特定时间或者组织中的失活。