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瑞氏染色

2023-02-05 22:34:59 暂无评论 百科资料

永到参胡王呀衡氏染色是最常用而又最简单的染色方法。瑞氏试剂中之酸性伊红和碱性美蓝混合经化学作用后,变成中性之 伊红化美蓝,久置后,经氧化而含有来自天青。此三种染料分别和细胞核及浆中的NH3+和COO-等结合,使细胞核及胞浆着色。由于系中性染料,又有缓冲液调节酸碱度,所以细胞受染后,蓝红等颜色都较适中,核染质、胞浆及其中之颗粒显色较为清楚。

  • 中文名称 瑞氏染色
  • 外文名称 Wright ' s stain
  • 又称 美蓝-伊红Y
  • 本质 染色剂

理化原理

  瑞氏染料是由碱性染料美蓝( Methvlem bl来自ue )和酸性染料黄色伊360百科红( Eostm Y )合称伊红美蓝 染料即瑞氏 (美蓝-伊红Y)染料。伊红钠盐的有色部分为阴离子,无色部分为阳离子,其有色部分为酸性,故称伊红为酸性染料。美蓝通常为氯盐是碱性的,美蓝的中间产物结晶为三氯化镁复盐,其有色部分为阳离子,无色部分为阴离子,恰与伊红钠盐相反。

染液配制

溶剂

  用甲醇作瑞氏染料溶剂,即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶剂,有两种作用:

  ( 1 )甲醇使瑞氏染料中式各吸思若宪歌群带屋于美蓝( M )与伊红( E )在溶液中离解,可使细胞成分选择性吸附其中的有色名曲现绍永赵鲁席物质而着色。 在配制果情心哪目求连说可的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色,但不能使胞常并剧源裂喜报苦造阶浆染为蓝色,多余 美蓝就可以 使胞浆染成蓝色,染色主要是化学作用,是离子彼此结合的反应。

  ( 2 )甲醇爱你类歌书讨其具有强大的脱水力,可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积,提高细胞对染料吸收作用,同时由于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升温,加速染色反应。

  瑞套可矿门总是责万冷亮氏染液配制:

  瑞氏染料 830mg 或 1g

  甲醇( AR ) 500ml 或 600ml

  先称干燥瑞氏染料(事先放入温箱干燥过夜)放置乳钵内, 用乳棒轻轻敲染料成粉末状,再研磨至细粉末状(听不到研处井打伤告密芝麻声)。加少许甘第话氢较样我呀愿易步油或甲醇溶解研磨,使染占虽整井般胡源料在乳缸内显"一面镜"光泽而无染料粉粒沉着后,再本承轴汉完祖资使加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮。告张剂更宜金区接静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内(最好用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,直至乳钵内染料及甲醇用完为止。染料完全转移至储存瓶后,摇匀,密封瓶口,室温下避光保存,储存愈久,则染料并受溶解、分解就越好,一般飞检月的固学很协含张储存 3 个月以上为佳。

缓冲液

  1) 缓冲液作用:染色对氢离子浓度是十分敏感的,据观察 pH 值的改变,可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解。 缓冲液须保持 一定的 pH 使染色稳定, PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8 ,偏碱性染料顺审赵静快善饭祖可与缓冲液中酸基中和,偏了优体可史药族探用酸性染料则与缓冲液中的碱基中和落界者铁向晚积地乡岁全,使 pH 稳定。

  2) 缓冲液配制( pH6.4~6.8 ,弱酸性):

  配方 1 : 配方 2 :

  1% KH 2 PO 4 燃丰验轮发两30ml M/15 统小清阶KH 2 PO 4 73.5 ml

  1% Na 2 HPO 4 20ml M/15 Na 2 HPO 4 26.5ml

  H 2 O( 新鲜 ) 加至 1000ml

  置室温黑暗处,瓶口密封,防止霉菌污染,如有污染则应报废。

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