什么是半定量峰
在分析生物样品中的分子量较小的化合物时,一般使用质谱技术。常常会遇到一种峰,也叫“鬼峰”,它的强度不像定量峰一样直接与溶液中物质的浓度成正比,但它有它的意义,这种峰就是所谓的半定量峰。
半定量峰的强度不是直接和溶液中物质的浓度成比例,但是半定量峰的强度和物质的存在数量是有关联的,主要跟样品中的物质含量、质谱仪的检出灵敏度、样品制备的方法以及操作者的技术水平等因素有关。
半定量峰的特点
半定量峰的特点是,它的强度难以精准测量,但它的存在和强度可以发出其他有价值的信息。半定量峰会在很多条件下出现,比如在溶剂、质谱仪设备和实验条件变化的情况下,因此实验者要谨慎对待半定量峰的存在。
具体来说,半定量峰在分析前需要进行处理,以消除分析误差。分析误差非常困扰实验人员,可以引起许多问题,包括信噪比低、信号漂移、校准值不准确、质谱仪灵敏度不稳定等。
半定量峰的持续时间
半定量峰的持续时间难以确定,因为它取决于样品中化合物的浓度、质谱仪的灵敏度和样品制备方法等多个因素。
相对于定量峰而言,半定量峰的浓度相对较低,因此持续的时间相对较长。在保持其他条件不变的情况下,半定量峰的峰面积和强度随着时间的推移而逐渐减小,直到完全消失。
实验中如何处理半定量峰
在半定量峰的处理过程中,我们需要做多重内标标准曲线。可以使用质谱仪的内标法或者加标法。内标法是在样品中添加已知浓度的化合物,用其作为内标,再通过将内标与分析物同时分析,根据内标分析的结果来计算分析物的含量。
加标法是在已知量样品中添加一定浓度的分析物化合物于样品中,同时加入内标物质作为对照标准,对加标化合物和内标物质一起进行质谱分析,计算样品中具体成分的含量。
除此之外,还需要定期校验仪器的灵敏度和标准品的准确度,并严格控制实验条件,以减小半定量峰的干扰。
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