1、实验目的
pET一cT技术是一种常用的蛋白表达和纯化技术，可以提高目标蛋白的产量和纯度。但是，频繁进行pET一cT实验可能会对细胞造成压力，影响目标蛋白的表达。因此，我们需要确定间隔多久做一次pET一cT实验，才能确保获得稳定高效地表达目标蛋白。
2、细胞生长情况
在进行pET一cT实验之前，需要对细胞的生长状态进行观察。如果细胞处于对表达蛋白不利的生长环境中，比如营养缺乏，温度过高或过低，就需要先优化细胞生长条件。同时，建议在细胞生长的第三阶段（指细胞处于对表达蛋白最有利的状态）进行pET一cT实验。
此外，每次pET一cT实验的细胞密度也应该控制在一定范围内，一般在细胞达到对表达蛋白最佳密度时进行实验。
3、目标蛋白的生理特性
目标蛋白的生理特性也是确定间隔时间的关键因素之一。如果目标蛋白对时间的敏感性较高，需要更短的时间间隔。另外，还需要了解目标蛋白的表达量和纯度，以便根据实验结果进行调整。
4、实验结果的影响
进行pET一cT实验的结果也需要考虑。如果目标蛋白表达量和纯度都达到了要求，那么可以增加实验间隔时间，减轻细胞的压力；反之，若表达量或纯度不够，就需要缩短实验间隔时间，促进目标蛋白的表达和纯化。